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    常見問題解答

    一 細胞污染的種類。

    細胞培養污染一般可分為微生物污染和真核生物污染。其中微生物污染包括真菌和酵母、細菌、支原體等。真核生物通常是細胞系之間的交叉污染。

    細菌、真菌或酵母的污染容易識別,可以通過培養基的顏色變化和顯微鏡下的觀察直接判斷。例如細菌污染后細胞培養基變黃,鏡下有小黑點,運動規律。酵母污染后,培養基變紫,鏡下透明,連成一串圓形。但是,如果是支原體污染的話,最初支原體生長緩慢,顯微鏡下很難看到,很難發現。

    真核細胞污染是指一種細胞污染另一種細胞,主要發生在操作不當,特別是在長期研究某些細胞系時。目前,越來越多的研究人員發現了細胞間污染這一被忽視的問題。據不完全統計,約15-20%的細胞被細胞間污染。

     

     

    二 細胞培養污染對實驗的影響。

    無論發生哪種污染,都會產生相同的結果。也就是說,必須重新做實驗,浪費工作時間,增加實驗成本,降低實驗重復性。并且在污染細胞和未污染細胞的基礎上進行試驗時,可能會得到完全不同的試驗結果。更嚴重的是,如果你研究的細胞是另一種細胞,所有的工作都可能不一樣。

    當前,關于細胞污染的報道越來越多。期刊《The Scientist》發表了Megan Scudellari 撰寫的題為 A case of mistaken identity 的文章,文中指出現已發表的 650 多項研究中所用的乳腺癌細胞可能并不是真正的乳腺癌細胞。


     

    三 避免細胞培養污染的方法。

     

    1) 正確的移液工具

    如果移液操作不當,分裝樣品可能會受到污染。因此,選擇合適的細胞培養移液管和高質量的耗材是保證分裝樣品清潔度的保證。與實驗室常用的雙鍵吸管相比,單鍵吸管可以更好地減少氣溶膠污染,因為單鍵吸管撞擊吸盤時活塞不需要反彈,直接按壓

     

     2)具有生物安全柜功能的濾芯吸頭

    除吸管外,使用濾芯吸頭可減少氣溶膠污染。首選雙濾芯吸入頭。它有兩層過濾元件和不同的孔徑,以確保超高的阻隔效率。濾芯性能符合en 1822標準(空氣過濾等級),并具有HEPA E12過濾性能

     

     3)使用培養瓶培養細胞,尤其是帶有透氣蓋的培養瓶。與培養皿或培養板相比,只有培養瓶口可以與外界連接,減少了外界氣體和微生物與培養細胞的接觸,降低了污染的可能性。帶有濾膜的透氣瓶蓋能更有效地防止細菌、病毒和支原體的污染

     

     4)水浴設備應清潔保養良好

    水是主要污染源之一。使用水浴設備進行細胞復蘇時,必須注意防止細胞培養細菌或霉菌污染。相關設備應每周覆蓋并徹底清潔??梢栽谒≈刑砑右志鷦?,以限制細菌增殖。錐形瓶/樣品管從水浴中取出后應進行有效消毒。相比之下,金屬浴可以提供無污染的溫度控制條件。金屬浴的恒溫設備比水浴的恒溫設備更能有效地控制污染。

    (5)二氧化碳培養箱是細胞培養的關鍵設備。根據英國癌癥醫學雜志2014年的《生物醫學研究中細胞系的使用指南》,對于如何選擇二氧化碳培養箱的標準有明確的建議:

        1 二氧化碳培養箱應采用防銹材料制成,如不銹鋼。其他材料如純銅盒在防止霉菌污染方面也有顯著效果。

     2。內罐表面應光滑,無焊縫,便于清潔

     3。在高溫滅菌前,可完全拆卸擱板和擱板框架進行清潔和準備

     4。一些培養箱內置HEPA過濾器以過濾內部空氣。然而,只有通過設計沒有風扇的培養箱,我們才能真正減少由于室內空氣快速流動而導致污染物擴散的可能性。

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    英瀚斯生物,公司自建有標準的細胞培養房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、三氣細胞培養箱、二氧化碳細胞培養箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、酶標儀、流式細胞儀等設備。細胞組技術人員畢業于東南大學、華中科技大學等知名高校生物學相關專業,具有碩士研究生以上學歷,熟練掌握細胞學相關實驗,可開展多種細胞實驗。


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