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    通便功能動物實驗評價方法

    1 實驗項目

     

    1.1小腸運動實驗

     

    1.1.1實驗原理:

     

    經口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺,建立小鼠小腸蠕動抑制模型,計算一定時間內小腸的墨汁推進率,來判斷模型小鼠胃腸蠕動功能。

     

    1.1.2實驗方法

     

    選用成年健康雄性小鼠,體重在18-22g,每組10-15只。實驗設三個劑量組,一個陰性對照組,一個模型對照組,必要時設陽性對照組。陰性對照組和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時間7天,各組小鼠禁食不禁水 20小時。模型對照組和三個劑量組灌胃給予復方地芬諾酯5-6mg/kg BW,陰性對照組給蒸餾水。給復方地芬諾酯或洛哌丁胺0.5小時后,劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁,陰性和模型對照組給墨汁灌胃。25分鐘后立即脫頸椎處死動物,打開腸腔分離腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線,測量腸管長度為“小腸總長度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。

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    1.2排便時間、糞便粒數和糞便重量的測定

     

    1.2.1原理:

     

    經口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺,建立小鼠便秘模型,測定小鼠首粒排黑便排便時間、5或6小時內排便粒數和排便重量,來反映模型小鼠的排便情況。

     

    1.2.2實驗方法

     

    選用成年健康雄性小鼠,體重在18-22g,每組10-15只。實驗設三個劑量組,一個陰性對照組和一個模型對照組,必要時設陽性對照組??瞻讓φ战M和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時間7天,各組小鼠禁食不禁水 20小時。陰性對照組給蒸餾水,模型對照組和三個劑量組灌胃給予復方地芬諾酯10-12mg/kg BW。給復方地芬諾酯0.5小時后,陰性對照組和模型對照組小鼠用墨汁灌胃,劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁,動物單籠飼養,正常飲水進食。從灌墨汁開始,記錄每只動物首粒排黑便時間、5或6小時內排便粒數及重量。

     

    2 實驗原則

     

    2.1 動物實驗和人體試食實驗所列指標均為必做項目。

     

    2.2 實驗中復方地芬諾酯或洛哌丁胺的造模劑量應通過預實驗確定。

     

    2.3 除對便秘模型動物各項必測指標進行觀察外,還應對正常動物進行觀察,不得引起動物明顯腹瀉。

     

    2.4 排便實驗中模型成立的條件為排首粒黑便時間、5或6小時內排糞便重量和糞便粒數與陰性對照組差異均有顯著性。

     

    2.5排便次數的觀察時間實驗前后應保持一致。

     

    3 動物實驗結果判定

     

    五到六小時內排糞便重量和糞便粒數任一項結果陽性,同時小腸運動實驗和排便時間任一項結果陽性,可判定該受試樣品通便功能動物實驗結果陽性。


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